紫外可见分光光度计校准,第三方仪器校准机构,计量检定和计量校准,计量检定与校准的区别

被检项目：长度

校准规范：紫外、可见、近红外分光光度计检定规程 JJG 178

测试范围：(190～900)nm,(5～40)%

扩展不确定度(k=2)：U=(0.2～0.5)nm,U=0.4%

紫外分光光度法是利用物质对紫外光谱区域内的光具有选择性吸收的现象，对物质进行定性和定量分析的方法 。用于测量和记录待测物质分子对紫外光的吸光度及紫外吸收光谱，并进行定性定量以及结构分析的仪器，称为紫外吸收光谱仪或紫外分光光度计。

紫外分光光度计的使用

1开机

打开样品室盖，检查样品室中是否放置遮光物，若有取出。打开电源开关，仪器进入预热状态，预热20min。

2选择光源（此操作适用于紫外-可见分光光度计）

电源开关打开后，钨灯即亮；若仪器需要在紫外光区（200nm～290nm）工作，则需将光源切换至氘灯；若仪器需要在紫外光区（290nm～360nm）工作，则要同时点亮氘灯和钨灯。

3选择波长

调节波长旋钮或输入实验所需的波长，选择须用的单色光波长。

4校准

目前型号较新的分光光度计具有开机自动校准功能，无自动校准功能的设备使用前需参照使用说明书手动校准。

5测量

如试验方法中无特别规定，通常使用装有蒸馏水的吸收池调零后放入样品和参比样进行测试，并记录测试结果。

6数据处理

定量测试时通常需要先测定若干个已知浓度的待测物标准样品，根据其吸光值与浓度绘制标准曲线。目前新型号的紫外分光光度计本身都有制作和计算标准曲线的功能，具体操作方式可参照设备使用说明。不具备标准曲线绘制功能的设备，可利用Excel软件或坐标纸辅助绘制。

7关机

测量完毕，取出吸收池，清洗并晾干后入盒保存。关闭电源，拔下电源插头，在样品室内放入干燥剂，盖上样品室盖，罩上防尘罩。

维护与保养

1氘灯的更换

1）关闭电源，取下波长调节钮，掀开仪器盖板。

2）待灯冷却后，用螺丝刀将接线架上三根氘灯引线松开（记下三根引线的颜色）， 松开氘灯固定螺钉，取出氘灯座，松开夹紧螺钉，换上新氘灯，调整位置，重新拧 紧螺钉，将氘灯接线按原来引线的颜色接好。

3） 将波长调在 220nm 处，接上电源， 打开氘灯，检查光斑是否进入狭缝，如不进入，松开图 1-2 中的“1”，转动氘灯出光孔或松开图1-2中的“3”，移动氘灯至 氘灯光进入狭缝为止（注意！眼睛不可常看氘灯发出的紫光）。

1-夹紧螺钉；2-灯出光口；3-灯座紧固螺钉

2波长准确度的校验

在紫外光区检 验波长准确度比较实用的方法是用苯蒸气的吸收光谱曲线来检查。图 1-3 是苯蒸气在紫外光区的特征吸收峰，利用这些吸收峰所对应波长来检查仪器波长准确度非常方便。 具体做法是：在吸收池滴一滴液体苯，盖上吸收池盖，待苯挥发充满整个吸收池后，就 可以测绘苯蒸气的吸收光谱。若实测结果与苯的标准光谱曲线不一致，表示仪器有波长误差，必须加以调整。

3透射比正确度的检验

当用紫外分光光度计测量具有十分尖锐吸收峰的化合物时有必要对分光光度计的透射比进行校正。透射比的正确度通常是用硫酸铜、硫酸钴铵、铬酸钾等标准溶液来检查，其中应用最普遍的是重铬酸钾（K2Cr2O7）溶液。

透射比正确度检验的具体操作是：取0.006gK2Cr2O7溶于1000g 0.001mol/LHClO4标准溶液 。 0.001mol/LHClO4 溶液为参比，用 1cm 的石英吸收池分别在 235nm、257nm、313nm、350nm 波长处测定透射比，与表 1-4 所列标准溶液的标准值比较，根据仪器级别，其差 值应在 0.8%～2.5%之内。

4吸收池的配套性检验

一般商品吸收池的光程与其标示值常有微小的误差，即使是同一生产厂家生产的同规格的吸收池，也不一定能够互换使用。仪器出厂前吸收池是经过检测选择而配套的， 所以在使用时不应混淆其配套关系。

在定量工作中，为了消除吸收池的误差，提高测量 的准确度，需要分别对每个吸收池进行校正及配对。吸收池配套性检验的具体步骤 如下：

1）检查吸收池透光面是否有划痕或斑点，吸收池各面是否有裂纹，如有则不应使用。

2）在选定的吸收池毛面上口附近，用铅笔标上进光方向并编号。用蒸馏水冲洗 2～3 次（必要时可用（1+1）HCl 溶液浸泡 2～3min，再立即用水冲洗净）。

3）拇指和食指捏住吸收池两侧毛面，分别在 4 个吸收池内注入蒸馏水到池高 3/4处（注意！吸收池内蒸馏水不可装得过满以免溅出腐蚀吸收架和仪器。装入水后，吸收池内壁不可有气泡）。用滤纸吸干池外壁的水滴（注意！不能擦），再用擦镜纸或丝绸轻轻擦试光面至无痕迹。按吸收池上所标箭头方向（进光方向）垂直放在吸收池架上，并用吸收池夹固定好。

4）石英吸收池内装上蒸馏水，在 220nm 处，以其中一个吸收池为参比，归零，测量其他各池的透射比，透射比的偏差小于0.5%的吸收池可配成一套。